همسانه‌سازی ژن شبه انسولین انسانی در ناقل‌های بیانی گیاهی
- منتشر شده در شنبه, 01 شهریور 1399 09:24
گیاهان تراریخته، بیورآکتورهای مناسبی برای تولید پروتئین‌های نوترکیب در سطوح بالا و با کیفیت بهتر می‌باشند. همسانه‌سازی ژن کدکننده پروتئین هدف در ناقل بیانی مناسب یکی از مراحل مهم در انتقال و بیان موفق پروتئین در گیاه مورد نظر می‌باشد.
هدف از این تحقیق، همسانه‌سازی cDNA فاکتور رشد شبه انسولین-1 (IGF1) در ناقل‌های بیانی مناسب گیاهی بود. برای این منظور، ابتدا با استفاده از یک جفت آغازگر اختصاصی، cDNAی ژن IGF1 تکثیر و با استفاده از سایت‌های برشی تعبیه شده در ساختار آغازگر در ناقل پایه pMCS5 وارد گردید. با توجه به مزایای غلات بدلیل کشت وسیع، بیوماس بالا، قابلیت ذخیره دانه و قابلیت استفاده خوراکی برای تولید پروتئین‌های دارویی، پس از توالی‌یابی، cDNA در یک ناقل مناسب برای انتقال و بیان پروتئین در غلات همسانه‌سازی گردید. همچنین با توجه به اینکه کلروپلاست‌های تراریخته پتانسیل بیشتری برای تولید پروتئین نوترکیب عملکردی در سطوح بالا دارند، cDNAی توالی‌یابی شده در دو ناقل اختصاصی برای انتقال و بیان IGF1 در کلروپلاست توتون نیز همسانه‌سازی گردید. در یکی از این ناقل‌ها، ژن گزینشگر بوسیله دو توالی مستقیم LoxP احاطه شده تا امکان حذف ژن انتخابگر از طریق سیستم Cre/Lox پس از گزینش گیاهان تراریخت فراهم گردد.
نویسندگان:
سرگل دارابی؛ سونیا رمضانی؛ محمد احمدآبادی
مجله بیوتکنولوژی کشاورزی، دوره 9، شماره 1، تابستان 1396، صفحه 15-30
دریافت متن کامل مقاله:
پایگاه اطلاع‌رسانی بیوتکنولوژی ایران